總抗氧化能力(DPPH法)測試盒_分光光度法
測定方法:分光光度法
產品規格:50管/48樣
注 意:正式測定之前選擇 2-3 個預期差異大的樣本做預測定。
總抗氧化能力(DPPH法)測試盒_分光光度法
研究意義:
測定對象中各種抗氧化物質和抗氧化酶等構成總抗氧化水平。在生物學、醫學和藥學研究中常常檢測血漿、血清、唾液、尿液等各種體液,細胞或組織等裂解液、植物或中草藥抽提液及各種抗氧化物(antioxidant)溶液的總抗氧化能力。
測定原理:
DPPH 為穩定的自由基 ,溶于甲醇、乙醇等極性溶劑中,在 515nm 處有大吸收。向 DPPH 溶液中加入抗氧化劑時,會發生脫色反應,因此可用吸光度的變化并以 Trolox 作為對照體系量化抗氧化物質的抗氧化能力。
自備實驗用品:
恒溫水浴鍋、低溫離心機、分光光度計、1mL 玻璃比色皿和蒸餾水。
試劑組成和配制:
提取液:液體 60mL×1 瓶,使用前預冷。
試劑一:液體 60mL×1 瓶,避光保存。
樣品的制備:
(1) 血清、血漿、唾液或尿液等液體樣品血漿(制備時可以使用肝素或檸檬酸鈉抗凝,不宜使用 EDTA 抗凝)4℃,5000rpm 離心10min,取上清待測。血清、唾液或尿液樣品直接用于測定,也可以-80℃凍存(不宜超過30d)后再測定。
(2) 組織樣品
按照組織質量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g 組織,加入 1mL 提取液)進行冰浴勻漿,然后 10000g,4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。
(3)細胞樣品
按照細胞數量(104 個):提取液體積(mL)為 500~1000:1 的比例(建議 500 萬細胞加入 1mL 提取液),冰浴超聲波破碎(功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復 30 次);10000g,4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。