人ELISA試劑盒應選用有國家批準文號，質量靠得住的產品，不能圖便宜，忽視質量保證。試劑應妥善保存于4℃冰箱內，在使用時先平衡至室溫，不同批號的試劑組分不宜交叉使用。試劑開啟后要在一周內用完，剩余的試劑下次用時應先檢查是否變質，顯色劑如被污染變色將造成全部顯色，導致錯誤結果。

溫育常采用的溫度。室溫溫育時要平置于操縱臺上即可。這是一個逐步平衡的過程，因此需經擴散才能達到反應的終點。一般有兩次抗原抗體反應，即加標本和加酶結合物后。
保溫的方式除有的儀器附有特制的電熱塊外，一般均采用水浴，可將ELISA試劑盒板置于水浴箱中，ELISA試劑盒板底應貼著水面，使溫度迅速平衡。為避免蒸發，板上應加蓋，也可用塑料貼封紙或保鮮膜籠蓋板孔，此時可讓反應板漂浮在水面上。ELISA試劑盒若用保溫箱，應放在濕盒內，濕盒要選用傳熱性良好的材料如金屬等，在盒底墊濕的紗布，zui后將板放在濕紗布上。應留意溫育的溫度和時間應按劃定力求正確。抗原抗體反應4℃更為*，在放射免疫測定中多使反應在冰箱中過夜，以形成zui多的沉淀。