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蛋白能溶于水是因為其表面有親水性氨基酸,ELISA試劑盒在蛋白質的等電點處若溶液的離子強度特別高或者特別低,蛋白則傾向于從溶液中析出。硫 酸銨是沉淀蛋白zui常用的鹽,因為它在冷的緩沖液中溶解性好,冷的緩沖液有利于保持目的蛋白的活性。硫 酸銨分餾常用作試驗室蛋白純化的*步,它可以初步粗提蛋白質,去除非蛋白成分。蛋白質在硫 酸銨沉淀中較穩定,可以短期在這種狀態下保存中間產物,當前蛋白質純化多采用這種辦法進行粗分離翻。ELISA試劑盒在規模化生產上硫 酸銨沉淀方法仍存在一些問題,硫 酸銨對不銹鋼器具的腐蝕性很強。其他的鹽如硫 酸鈉不存在這種問題,但其純化效果不如硫 酸銨。 除了鹽析外蛋白還可以用多聚物如PEG和防凍劑沉淀出來,PEG是一種惰性物質,同硫 酸銨一樣對蛋白有穩定效果,ELISA試劑盒在緩慢攪拌下逐漸提高冷的蛋白溶液中的PEG濃度,蛋白沉淀可通過離心或過濾獲得,蛋白可在這種狀態下*保存而不損壞。蛋白沉淀對蛋白純化來說并不是多么好的方法,因為它只能達到幾倍的純化效果,而我們在達到目的前需要上千倍的純化。其好處是可以把蛋白從混雜有蛋白酶和其他有害雜質的培養基及細胞裂解物中解脫出來。
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